ابداع روش جدید تولید هورمون رشد انسانی
هورمون رشد انسانی یک پروتئین تک رشته است که دارای 191 اسید آمینه و وزن مولکولی حدود 22 کیلو دالتون است. به علت فعالیت های زیستی مهم و متنوع هورمون رشد، این هورمون دارای کاربردهای گسترده ای در پزشکی و بیوتکنولوژیست. از اواخر سال 1970 استفاده از بیان ژن برای تولید پروتئین های نوترکیب صنعتی تبدیل به یک صنعت چند میلیارد دلاری شده است.
از طرفی مشکلاتی که در استخراج پروتئین درون سلولی وجود دارد باعث شده است که چندین روش برای این کار ارائه شود که در بسیاری از این روش ها نیاز به تجهیزات خاص است؛ اما در بیشتر مطالعات، پژوهشگران نیاز به یک روش سریع و ارزان قیمت برای تخریب سلول دارند. به تازگی تحقیقاتی توسط دانشمندان ایرانی انجام شده است که هدف این پژوهش ها، تولید هورمون رشد انسانی نوترکیب و مقایسه میزان استخراج آن با روش انجماد و ذوب و روش اولتراسونیک در سویه اوریگامی اشریشیاکلی است.
روش کار این دانشمندان به این ترتیب بوده است که ابتدا سلول ها مستعد سویه اوریگامی اشریشیاکلی با وکتور حاوی ژن هورمون رشد انسانی ترانسفورم شده و با کشت در محیط LB و القا با IPTG هورمون رشد انسانی نوترکیب تولید و با دو روش انجماد و ذوب و اولتراسونیک، استخراج و سپس این پروتئین با استفاده از روش ها الایزا، برادفورد، دات بلات و وسترن بلات بررسی شدند.
در نتیجه این فرایند مشخص شد که عمل ترانسفورم کردن باکتری با کارایی بالایی انجام گرفته است و نتایج حاصل از دات بلات و وسترن بلات نشان داد که پروتئین هورمون رشد انسانی نوترکیب به خوبی تولید شده است. با استخراج پروتئین با روش ها انجماد و ذوب و اولتراسونیک و بررسی نتایج حاصل از روش های الایزا و برادفورد مشخص شد که میزان پروتئین استخراج شده در روش انجماد و ذوب آهسته بیشتر از انجماد و ذوب سریع و کمابیش هم اندازه پروتئین استخراج شده در روش اولتراسونیک است.
به این ترتیب می توان گفت که برابر بودن میزان پروتئین استخراج شده در روش انجماد و ذوب آهسته و روش اولتراسونیک نشان دهنده این است که روش انجماد و ذوب آهسته، در مواردی که امکان استفاده از تجهیزات خاص و گران قیمت مثل اولتراسونیک وجود ندارد، جایگزین مناسبی برای این روش است.
منبع: مرضیه سواری، سیدحمید زرکش اصفهانی، 1394 تولید هورمون رشد انسانی نوترکیب در سویه اوریگامی اشریشیاکلی و مقایسه میزان استخراج آن با دو روش اولتراسونیک و انجماد و ذوب. فصلنامه زیست شناسی میکروارگانیسم ها، سال چهارم، شماره 14.