تیلریوز یکی از بیماری های تک یاخته ای خونی در گاو بوده که سبب مرگ و میر بالا می شود. تاکنون مطالعات میکروسکوپی زیادی درباره شناسایی گونه های آلوده کننده تیلریا در گاو و کنه های ناقل صورت گرفته که در مقایسه با روش های مولکولی از حساسیت و ویژگی کمی برخوردارند
تیلریا آنولاتا و کنه هیالوما آناتولیکوم آناتولیکوم عامل و ناقل مهم تیلریوز گرمسیری در شهرستان یزد هستند..
به منظور بررسی دقیق تر این بیماری، دانشمندان دست به پژوهشی بومی زدند و در این مطالعه سعی شد تا گونه های تیلریا و ناقلین آن در گاوهای شهرستان یزدباروش Semi-nested PCR مورد شناسایی قرار گیرند.
طی ماه های خرداد تا شهریور سال 1391، تعداد 100 نمونه خون EDTA به همراه گسترش های نازک خون از گاوهای شیری نژاد هلشتاین مشکوک به تیلزیوز بدون سابقه واکسیناسیون علیه بیماری تهیه گردید. هم زمان با بازرسی بدن گاوها تعداد 249 عدد کنه جمع آوری شدند. پس از آن گسترش تهیه شده با گیمسا رنگ آمیزی شدند و دی ان ای از نمونه های خون با استفاده از کیت تجاری استخراج گردیدند.
هم چنین کنه ها با استفاده از کلید های تشخیص شناسایی و بر اساس جنس و گونه کنه به 50 مجموعه 5 کنه ای تقسیم شدند و با استفاده از لوپ و وسایل حشره شناسی غدد بزاقی آنها جدا سازی و دی ان ای آنها نیز استخراج گردید. نمونه های دی ان ای استخراج شده با Semi-nested PCR بر روی ژن 18S rRNA، مورد آزمایش قرار گرفتند. جهت تشخیص تیلریا لستوکاردی و تفریق آن از تیلریا آنولاتا در نمونه های کنه از روش PCR-RFLP استفاده شد.
نتایج نشان دادند که در بررسی اولیه انجام شده با میکروسکوپ نوری، در 4 گسترش خونی (4%) اشکال حلقوی انگل مشاهده گردید. هم چنین همه کنه های جمع آوری شده هیالوما آناتولیکوم آناتولیکوم تشخیص داده شدند. نتایج به دست آمده با روش Semi-nested PCR، نشان دهنده آلودگی 11 نمونه خون (11%) و سه مجموعه غدد بزاقی کنه به تک یاخته تیلریا آنولاتا بودند. هیچ یک از نمونه ها آلوده به تیلریا اورینتالیس نبودند. مطالعات تکمیلی با PCR-RFLP با استفاده از آنزیم MspI نیز نشان داد که نمونه های کنه ها همگی از نظر آلودگی به تیلریا لستوکاردی منفی هستند.
نتیجه گیری نهایی بر پایه نتایج به دست آمده توسط این پژوهشگران این رود که تیلریا آنولاتا و کنه هیالوما آناتولیکوم آناتولیکوم عامل و ناقل مهم تیلریوز گرمسیری در شهرستان یزد هستند.
منبع: صغری خدابنده، غلامرضا رزمی، 1394، شناسایی مولکولی گونه های تیلریا و ناقلین آن در گاوهای شهرستان یزد با روش Semi-nested PCR. مجله تحقیقات دامپزشکی، سال هفتادم، شماره 3 (پیاپی 283).